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脲对造成小鼠高尿酸血症模型

时间: 2025-07-26 21:30:26     来源: keytrack.fastseoul.com     作者: 艺术盛宴

  

1.4.4 肉桂醛缩氨基脲对小鼠血尿酸质量浓度、肉桂血清XOD活性和肝脏XOD活性的醛缩影响

参照文献方法,用氧嗪酸钾和尿酸腹腔注射小鼠。氨基连续2天,脲对造成小鼠高尿酸血症模型。黄嘌化酶雄性昆明种小鼠适应性饲养一周后,呤氧随机分成正常对照组、制作高尿酸模型组、用研别嘌呤醇组、肉桂肉桂醛缩氨基脲组、醛缩肉桂醛组共5组,氨基每组10只。脲对正常对照组和高尿酸模型组,黄嘌化酶每天按20mL/kg剂量灌胃生理盐水,呤氧持续6天。制作别嘌呤醇组每天按10mg/kg剂量灌胃1次,持续6天。肉桂醛组、肉桂醛缩氨基脲组小鼠每天按0.1g/kg剂量灌胃6天。从给药第5天开始,除正常对照组外,其他各组每天灌胃前1h均要腹腔注射0.3g/kg氧嗪酸钾和0.25g/kg尿酸,每天1次,连续2天进行造模。在第6天灌胃1h后,小鼠进行断头采血,血样分别置于1.5mL离心管中,在4℃冰箱中凝固2h,在4℃下3000r/min离心5min。每份血清进行血尿酸和血清XOD活性测定。采血后,取出肝脏,匀浆处理,离心取上清,测XOD活性。

用尿酸测定试剂盒测定血尿酸质量浓度,用试剂盒法测定小鼠血清XOD和肝脏XOD活性。

1.5 统计学处理

用SPSSl9.0软件进行统计分析,计量资料以平均值±标准偏差表示,组间比较用t检验。

2 结果与分析

2.1 化合物结构表征

化合物a(肉桂醛缩氨基脲,cinnamicaldehydesemicarbazone,CAS):无色针晶(CH30H);UV(MeOH)λmax308,306nm;IR(KBr)νmax3282,1644,1604cm-11H-NMR(400MHz,DMSO-d6);δ10.174(s,1H,NH)7.653(s,1H,CH=N),7.49(d,2H,Ph-H),7.345(t,2H,Ph-H),7.265(t,1H,Ph-H),6.852(d,2H,CH=CH),6.26(s,2H,NH2);ESI-MS,m/z=189.23,[M+H]+(C10H11N30)。其IR、1H-NMR、ESI-MS数据与文献报道一致。

化合物b(肉桂醛缩氨基硫脲,cinnamaldehvdethiosemicarbazide,CT):浅黄色菊花晶(CH30H);UV(MeOH)λmax352,348nm;IR(KBr)νmax3262,1592cm-11H-NMR(400MHz,DMS0-d6):δ11.350(s,1H,NH),8.123(s,1H,CH=N),7.859(d,1H,Ph-H),7.539(d,2H,NH2),7.541(d,1H,Ph-CH=),7.341(t,3H,Ph-H),6.998(d,1H,Ph-H),6.838(q,1H,=CH-);ESI-MS,m/zMr=205.3,[M+H]+(C10H11N3S)。其IR、1H-NMR、ESI-MS数据与文献报道一致。

化合物c(肉桂醛缩甲基氨基硫脲,cinnamaldehvdeshrinkagemethvlthiosemicarbazide,CSMT):黄色粉末(CH30H);UV(Me0H)λmax305,358nm;IR(KBr)νmax3362,1552cm-11H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.401(s,1H,NH),8.24(s,1H,CH=N),7.87(d,1H,CH=),7.521(d,2H,Ph-H),7.36(t,2H,Ph-H),7.294(t,1H,Ph-H),6.988(d,1H,CH=),6.833(m,1H,NH),2.942(d,3H,CH3);ESI-MS,m/zMr=219.32,[M+H]+(C11H13N3S)。

化合物d(肉桂醛缩4-苯基氨基硫脲,cinnamaldehvdeshrinkagephenvlthiosemicarbazide,CSPT):无色针晶(CH30H);UV(MeOH)λmax305,350nm;IR(KBr)νmax3313,1594cm-11H-NMR(400MHz,DMS0-d6):δ11.79(s,1H,NH),9.89(s,1H,NH-Ph),7.98(s,1H,CH=N),6.96(dd,1H,=CH-),7.05(d,1H,Ph-CH=),7.15(d,1H,Ph-H),7.35(m,5H,Ph-H),7.58(dd,4H,Ph-H);ESI-MS,m/zMr=281.39,[M+H]+(C16H15N3S)。其IR、1H-NMR、ESI-MS数据与文献报道一致。

2.2 化合物对XOD抑制活性

肉桂醛及其席夫碱衍生物对XOD的抑制率见图2。其中各折线依次代表抑制剂别嘌呤醇、肉桂醛缩氨基脲、肉桂醛、肉桂醛缩苯基氨基硫脲、肉桂醛缩甲基氨基硫脲、肉桂醛缩氨基硫脲。由图2可知,同一种抑制剂,浓度越大,酶活性越低。别嘌呤醇、肉桂醛缩氨基脲、肉桂醛、肉桂醛缩苯基氨基硫脲、肉桂醛缩甲基氨基硫脲、肉桂醛缩氨基硫脲抑制XOD的IC50值分别是(7.05±0.14)、(55.48±0.54)、(90.93±0.72)、(122.48±0.65)、(201.29±0.88)、(241.57±1.32)μmol/L(n=3)。各化合物活性顺序是别嘌呤醇>肉桂醛缩氨基脲>肉桂醛>肉桂醛缩苯基氨基硫脲>肉桂醛缩甲基氨基硫脲>肉桂醛缩氨基硫脲。

肉桂醛缩氨基脲对XOD抑制活性比肉桂醛强,且活性接近阳性药别嘌醇。肉桂醛缩氨基脲抑制XOD活性比肉桂醛缩氨基硫脲类化合物强,可能与氨基脲上的羰基能与XOD酶上的氨基酸残基形成氢键,而硫脲不能形成氢键有关。抑制XOD活性,苯基取代硫脲>甲基取代硫脲>硫脲。这可能与疏水性有关,苯基的疏水性最大,其次是甲基,然后是无取代基。即疏水性基团越大,抑制活性越好。由于肉桂醛缩氨基脲抑制XOD活性最强,以下测定抑制机理和抑制类型就只研究肉桂醛缩氨基脲。

2.3 肉桂醛缩氨基脲对XOD抑制类型

在测活体系中,固定底物黄嘌呤浓度,改变XOD酶的质量浓度,测定不同浓度的抑制剂肉桂醛缩氨基脲(0、50、75、100μmol/L)对XOD酶活性的影响。由图3可知,以酶促反应的速度对酶质量浓度作图,为一组通过原点的直线,由此判断肉桂醛缩氨基脲对XOD抑制机理为可逆抑制。

 相关链接:肉桂醛黄嘌呤尿酸硫脲

 


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